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1. 基于实时荧光定量环介导等温扩增技术快速检测发酵乳中嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌
周帅康,胡连霞,王孟阳,李苗,卢涵,王世杰
乳业科学与技术    2024, 47 (3): 9-15.   DOI: 10.7506/rykxyjs1671-5187-20240505-033
摘要124)   HTML8)    PDF (2254KB)(69)    收藏
基于实时荧光定量环介导等温扩增(quantitative loop-mediated isothermal amplification,qLAMP)技术建立发酵乳中嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌活菌数快速定量方法。通过优化嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)处理条件,对菌浓度对数与相应的循环阈值进行线性拟合,构建标准曲线,建立PMA-qLAMP检测方法。结果表明,该方法对嗜热链球菌的最低定量限为7.2×103 CFU/g,对保加利亚乳杆菌的最低定量限为5.6×104 CFU/g,将该方法应用于市售发酵乳产品活菌数定量检测,显示出良好的灵敏度和实用性。
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2. 两歧双歧杆菌TMC3115冻干菌粉生产工艺优化
杨玲, 张栋, 齐世华, 马新颖, 周帅康, 艾连中, 王世杰
乳业科学与技术    2021, 44 (5): 12-17.   DOI: 10.15922/j.cnki.jdst.2021.05.003
摘要274)   HTML4)    PDF (2146KB)(927)    收藏
为制备高活性两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)TMC3115冻干菌粉,对培养基初始pH值和初始接种量进行研究,同时对不同碳源和氮源进行初步筛选,进而以发酵16 h发酵液pH值、光密度和活菌数为评价指标,通过正交试验对碳源和氮源组合进行筛选。考察18 种冻干保护剂对两歧双歧杆菌TMC3115的冻干保护效果,并通过正交试验确定复合冻干保护剂配方。结果表明:两歧双歧杆菌TMC3115在培养基初始pH值7.2、接种量4%时所得发酵液活菌数最高;两歧双歧杆菌TMC3115发酵培养基配方为葡萄糖添加量25 g/L、胰酪蛋白胨20 g/L、酵母蛋白胨10 g/L、酵母浸粉FM902 15 g/L、柠檬酸氢二铵2 g/L、无水乙酸钠5 g/L、磷酸氢二钾2 g/L、吐温-80 1 g/L、硫酸镁0.58 g/L、硫酸锰0.25 g/L、L-半胱氨酸盐酸盐0.5 g/L;最佳冻干保护剂配方为:脱脂乳添加量12%、海藻糖12%、丙三醇1.2%、谷氨酸钠0.6%、L-半胱氨酸盐酸盐0.15%,此条件下,两歧双歧杆菌TMC3115冻干粉活菌数达到4.26×1011 CFU/g。
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3. 发酵乳中两种发酵剂菌种PMA-qLAMP活菌检测方法建立
周帅康 胡连霞 王孟阳 李苗 卢晗 王世杰
乳业科学与技术    0, (): 0-0.  
摘要17)      收藏
基于实时荧光定量环介导等温扩增技术(quantitative loop-mediated isothermal amplification,qLAMP)技术,通过结合叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)建立了发酵乳中嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌快速定量方法。优化了嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌PMA处理条件,根据Ct值与菌浓度对数的函数关系进行线性拟合进而绘制了标准曲线,建立了PMA-qLAMP检测方法,并对从市场中购买的发酵乳产品进行了定量检测。该方法对嗜热链球菌最低定量限为 7.2×103 CFU/g,保加利亚乳杆菌最低定量限为 5.6×104 CFU/g,显示出良好的检测灵敏度和实用性。
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