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1. 生牛乳中芽孢杆菌的分离鉴定及其耐热性
侯霞霞, 王云霞, 刘丽君, 李翠枝, 吕志勇
乳业科学与技术    2022, 45 (6): 1-6.   DOI: 10.7506/rykxyjs1671-5187-20220913-057
摘要552)   HTML15)    PDF (2441KB)(747)    收藏
生牛乳杀菌后残留少数芽孢具有极强耐受性,在一定条件下芽孢大量繁殖,使牛乳发生变质,严重影响产品品质和消费者健康。采集并选择含有芽孢杆菌的生牛乳样品,进行需氧芽孢杆菌和嗜热需氧芽孢杆菌的分离,通过形态学、生理生化和分子生物学方法对分离菌株进行鉴定,同时对分离到的嗜热需氧芽孢杆菌进行耐热性研究。结果表明:共分离出10?株芽孢杆菌,其中3?株为嗜热需氧芽孢杆菌,7?株为需氧芽孢杆菌,其中能耐受115?℃/15?min热处理的有凝结芽孢杆菌和克劳氏芽孢杆菌,121?℃/20?min热处理可以将生牛乳中芽孢杆菌全部杀灭,致死率达100%,芽孢数下降4?个数量级;生牛乳中芽孢杆菌的优势菌有枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、明胶芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌和克劳氏芽孢杆菌;耐热性较强的有凝结芽孢杆菌和克劳氏芽孢杆菌,最高能耐受115?℃/15?min热处理。
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2. 乳粉中发酵乳杆菌CECT5716微生物检测方法的建立
王云霞, 侯霞霞, 赵淑环, 井丽娟, 刘丽君, 李翠枝
乳业科学与技术    2020, 43 (3): 23-26.   DOI: 10.15922/j.cnki.jdst.2020.03.005
摘要190)   HTML1)    PDF (2293KB)(159)    收藏
近年来乳粉中添加益生菌逐渐成为研究热点之一,为保证产品质量和安全,建立乳粉中发酵乳杆菌CECT5716的微生物检测方法。结果表明:在以缓冲蛋白胨水为稀释液进行10 倍系列稀释后,采用MRS平板涂布法,(36±1) ℃厌氧培养(48±2) h后,乳粉中发酵乳杆菌可准确计数,且能与乳粉中添加的双歧杆菌属细菌明显区分;该方法较GB 4789.35—2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》方法更适合发酵乳杆菌计数,具有区分度高、培养时间短、操作简单、重复性好、准确性高的优点;该方法增加了菌株16S rDNA序列测定,以进一步对发酵乳杆菌进行分子鉴定;通过对20 份自制样品进行检测评价,表明所建立的方法与国标方法的准确性无显著性差异(P=0.127)。
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3. 生物芯片技术检测奶牛饲料中多种真菌毒素
王云霞, 赵淑环, 侯霞霞, 刘丽君, 李翠枝, 吕志勇
乳业科学与技术    2019, 42 (4): 30-33.   DOI: 10.15922/j.cnki.jdst.2019.04.007
摘要116)   HTML0)    PDF (1677KB)(67)    收藏
利用生物芯片真菌毒素阵列,选用其中的赭曲霉毒素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素B1和玉米赤霉 烯酮4 个组分,同时测定其在奶牛饲料中的残留量,考察该生物芯片的准确性、精密度和重现性等指标。结果表 明:4 种真菌毒素的标准曲线线性相关系数均可达到0.99以上;试剂盒质控样品和阴性样品2 个水平的加标回收率 在80%~120%之间,变异系数(coefficient of variance,CV)在15%以内,方法准确性和重复性较好;对奶牛饲料 样品检测结果重现性考察的CV在10%以内,表明方法重现性较好;与高效液相色谱法相比,2 种检测方法的结果差 异性小,且生物芯片法前处理更为简便。真菌毒素阵列生物芯片法操作简单、结果准确,缩短了大量样本的筛查时 间,为批量样品筛查提供了可靠的技术保证。
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4. 肠道细菌基因间重复共有序列-聚合酶链式反应指纹图谱技术用于细菌分型的研究进展
侯霞霞, 王云霞, 胡雪, 吕志勇, 刘丽君, 李翠枝
乳业科学与技术    2019, 42 (2): 28-34.   DOI: 10.15922/j.cnki.jdst.2019.02.006
摘要125)   HTML0)    PDF (1667KB)(164)    收藏
肠道细菌基因间重复共有序列-聚合酶链式反应(enterobacterial repetitive intergenic consensus-polymerase chain reaction,ERIC-PCR)指纹图谱技术利用普遍存在于生物体内的ERIC进行引物设计,通过基因扩增,获得能 够表征其基因组结构的产物,该方法简单易行、重复性好、用时短,被广泛应用于细菌基因分型及同源性判别。本文简 述细菌分型的研究背景和ERIC-PCR指纹图谱技术的原理及特点,归纳该技术在细菌基因分型方面的优缺点及其在常见 食源性致病菌基因分型中的应用现状,并对ERIC-PCR指纹图谱技术应用于乳品企业污染菌溯源的研究进行展望。
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