检索结果

期刊

出版年

关键词

Please wait a minute...

选择:

导出引用
EndNote Ris BibTeX

显示/隐藏图片

Select

1. TaqMan探针实时荧光定量聚合酶链式反应检测低温酸乳中常见的霉菌和酵母

张捷，陈勃旭，杜海宽，张子仑，严陶陶，陈佳，周巍

乳业科学与技术 2024, 47 (5): 20-24. DOI: 10.7506/rykxyjs1671-5187-20240703-049

摘要（70）

HTML （3）

PDF （2127KB）（80）

为提高低温酸乳中霉菌和酵母菌检测效率，根据保守基因延伸因子1α（elongation factor 1α，EF-1α）序列分别针对霉菌与酵母菌设计引物与探针，利用实时荧光定量聚合酶链式反应，基于TaqMan探针分别建立霉菌和酵母菌检测方法。以低温酸乳中常见真菌与乳酸菌基因组DNA为扩增模板进行特异性检验，并对方法灵敏度与重复性进行检验，同时构建标准曲线。结果表明：根据EF-1α基因设计的引物与探针特异性良好；所构建的标准曲线相关系数均大于0.99；该方法检测酵母菌的灵敏度为101?CFU/mL，检测霉菌的灵敏度为102?CFU/mL；重复性检验中组内与组间的变异系数均小于2%，表明方法具有良好的可靠性与稳定性，适用于低温酸乳中霉菌与酵母菌的快速检测。

相关文章 | 多维度评价

Select

2. 微滴式数字PCR技术定量检测发酵乳中醋化醋杆菌

张雅伦, 王赞, 张瑞, 陈勃旭, 周巍, 张岩

乳业科学与技术 2023, 46 (2): 13-17. DOI: 10.7506/rykxyjs1671-5187-20220908-055

摘要（125）

HTML （4）

PDF （2201KB）（58）

建立一种微滴式数字聚合酶链式反应（droplet digital polymerase chain reaction，ddPCR）定量检测发酵乳中醋化醋杆菌的技术。根据醋化醋杆菌ITS基因序列设计特异性引物和探针，通过反应温度筛选优化ddPCR扩增条件，通过多种菌株扩增验证方法特异性，通过人工添加醋化醋杆菌验证方法检出限，通过ddPCR法实测结果和计数法测定结果之间的比较对其绝对定量进行系统性研究。结果表明：建立的发酵乳中醋化醋杆菌ddPCR定量检测方法，反应条件中最适退火温度为54.6?℃，方法特异性强，检出限为7.2×101?CFU/mL，灵敏度高，定量偏差率为23.73%。该方法可以满足发酵乳中醋化醋杆菌定量检测需求。