为保证原料乳质量，丰富检测原料乳中大肠菌群涉及到的培养基的验收质控菌株，采用GB 4789.28—2013《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》中规定的验收方法，分别选取3 个品牌的结晶紫中性红胆盐琼脂（violet red bile agar，VRBA）、结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂（violet red bile agar with MUG，VRBA-MUG）、月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（lauryl tryptose broth，LST）和煌绿乳糖胆盐肉汤（brilliant green lactose bile broth，BGLB），对其进行外观、pH值、水分含量等物理指标以及生长率、选择性等微生物指标实验评价。同时以弗式柠檬酸杆菌ATCC 43864为参照，选取7 株弗式柠檬酸杆菌对3 个品牌的VRBA、VRBA-MUG、LST和BGLB进行验收实验评价。结果表明：3 个品牌的不同培养基干粉颜色均正常，水分含量均控制在5%～6%，pH值均符合国家标准；7 株弗氏柠檬酸杆菌在3 个品牌VRBA、VRBA-MUG上的生长率均大于0.7；仅CMCC 48098和CICC 22910在3 个品牌的LST、BGLB中浊度达到2，且导管内产生气体，与ATCC 43864结果相同。综上，3 个品牌的VRBA、VRBA-MUG、LST和BGLB全部符合GB 4789.28—2013，推荐CMCC 48098和CICC 22910用作验收4 个培养基质控菌株的补充菌株。

建立微生物法测定婴幼儿配方乳粉中生物素含量的不确定度评定方法，以进行检测结果的质量控制，提高检测数据的准确性。按照GB 5009.259—2016《食品安全国家标准 食品中生物素的测定》进行婴幼儿配方乳粉中生物素含量的检测，根据JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》和GB/T 27418—2017《测量不确定度评定和表示》等要求，对检测过程中产生的各不确定度分量进行评定，合成标准不确定度。结果表明：标准曲线拟合和重复性检测产生的不确定度最大；婴幼儿配方乳粉中3 个含量生物素的不确定度报告：样品A（19.87±2.84） μg/100 g，样品B（30.35±4.41） μg/100 g，样品C（53.15±7.15） μg/100 g（置信区间95%，包含因子k=2）；随着样品中生物素含量的增高，检测结果的扩展不确定度也随之增大。

建立一种微滴式数字聚合酶链式反应（droplet digital polymerase chain reaction，ddPCR）定量检测发酵乳中醋化醋杆菌的技术。根据醋化醋杆菌ITS基因序列设计特异性引物和探针，通过反应温度筛选优化ddPCR扩增条件，通过多种菌株扩增验证方法特异性，通过人工添加醋化醋杆菌验证方法检出限，通过ddPCR法实测结果和计数法测定结果之间的比较对其绝对定量进行系统性研究。结果表明：建立的发酵乳中醋化醋杆菌ddPCR定量检测方法，反应条件中最适退火温度为54.6?℃，方法特异性强，检出限为7.2×101?CFU/mL，灵敏度高，定量偏差率为23.73%。该方法可以满足发酵乳中醋化醋杆菌定量检测需求。

通过依赖解旋酶恒温基因扩增（helicase-dependent isothermal DNA amplification，HDA）技术建立一种快速检测发酵乳中植物乳杆菌的方法。根据植物乳杆菌scrB基因序列（基因号为AJ579541.1）设计特异性引物，通过实验筛选出检测体系中UvrD解旋酶和T4 gp32蛋白的较优含量，达到最优反应条件。所建立的HDA方法通过人工添加植物乳杆菌确定检出限，通过多种菌株扩增验证方法特异性，通过扩增产物电泳和序列比对分析验证方法一致性和稳定性。结果表明：采用HDA法检测发酵乳中植物乳杆菌，反应体系中UvrD解旋酶和T4 gp32蛋白的适宜添加量分别为0.15 μg和5.0 μg，特异性良好，与涉及的其他菌株均未发生扩增，检出限为2.8×101 CFU/g，扩增序列与设计序列长度（273 bp）一致且序列同源性为100%；本研究建立的方法可以快速检测发酵乳中植物乳杆菌，具有灵敏度高、操作简单、应用前景广等特点。

通过真空冷冻干燥技术成功制备出单核细胞增生李斯特氏菌定性质控样品，并系统分析质控样品的均匀性和稳定性。通过优化冻干基质条件，得到制备质控样品的最佳条件。通过培养计数和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术，验证定性质控样品的均匀性和稳定性。结果表明：制备的单增李斯特菌定性质控样品为白色、质地均匀小球，均匀性验证实验质控样品培养计数结果F=0.567，小于临界值，表明均匀性一致；运输稳定性实验验证了质控样品在37、25?℃环境下含量几乎没有下降，计数稳定；贮藏稳定性实验验证了质控样品在－20?℃贮藏28?d后的复苏率为101.5%，在4?℃条件下贮藏28?d后的复苏率为99.6%，说明该样品均匀性和稳定性良好，可以作为阳性质控样品用于单增李斯特菌检测和质量控制。

为评估即用型沙门氏菌质控样品在基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术鉴定含乳特殊医学用途配方食品中沙门氏菌中的应用价值，通过验证即用型沙门氏菌质控样品的均匀性、稳定性，对－20 ℃贮藏0、14、28 d沙门氏菌质控样品进行质谱鉴定，最后用VITEK全自动微生物分析系统进行生化鉴定。结果表明：即用型沙门氏菌质控样品稳定性良好、均匀性符合要求，所得质谱图相近，VITEK生化鉴定结果为沙门氏菌；即用型沙门氏菌质控菌株可以作为含乳特殊医学用途配方食品中沙门氏菌检测质控样品使用。