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1. 微滴式数字PCR技术定量检测发酵乳中醋化醋杆菌
张雅伦, 王赞, 张瑞, 陈勃旭, 周巍, 张岩
乳业科学与技术    2023, 46 (2): 13-17.   DOI: 10.7506/rykxyjs1671-5187-20220908-055
摘要125)   HTML4)    PDF (2201KB)(58)    收藏
建立一种微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)定量检测发酵乳中醋化醋杆菌的技术。根据醋化醋杆菌ITS基因序列设计特异性引物和探针,通过反应温度筛选优化ddPCR扩增条件,通过多种菌株扩增验证方法特异性,通过人工添加醋化醋杆菌验证方法检出限,通过ddPCR法实测结果和计数法测定结果之间的比较对其绝对定量进行系统性研究。结果表明:建立的发酵乳中醋化醋杆菌ddPCR定量检测方法,反应条件中最适退火温度为54.6?℃,方法特异性强,检出限为7.2×101?CFU/mL,灵敏度高,定量偏差率为23.73%。该方法可以满足发酵乳中醋化醋杆菌定量检测需求。
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2. 基于飞行时间质谱法的单核细胞增生李斯特氏菌定性质控样品研制
张雅伦, 杨帆, 张涛, 张瑞, 李献, 周巍, 张岩
乳业科学与技术    2022, 45 (6): 27-32.   DOI: 10.7506/rykxyjs1671-5187-20220920-061
摘要148)   HTML0)    PDF (2073KB)(283)    收藏
通过真空冷冻干燥技术成功制备出单核细胞增生李斯特氏菌定性质控样品,并系统分析质控样品的均匀性和稳定性。通过优化冻干基质条件,得到制备质控样品的最佳条件。通过培养计数和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术,验证定性质控样品的均匀性和稳定性。结果表明:制备的单增李斯特菌定性质控样品为白色、质地均匀小球,均匀性验证实验质控样品培养计数结果F=0.567,小于临界值,表明均匀性一致;运输稳定性实验验证了质控样品在37、25?℃环境下含量几乎没有下降,计数稳定;贮藏稳定性实验验证了质控样品在-20?℃贮藏28?d后的复苏率为101.5%,在4?℃条件下贮藏28?d后的复苏率为99.6%,说明该样品均匀性和稳定性良好,可以作为阳性质控样品用于单增李斯特菌检测和质量控制。
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3. 含乳特殊医学用途配方食品中沙门氏菌检测即用型质控样品研制
张涛, 张瑞, 张雅伦, 许苗苗, 王慧, 陈晨, 周巍, 史国华
乳业科学与技术    2021, 44 (4): 29-33.   DOI: 10.15922/j.cnki.jdst.2021.04.007
摘要156)   HTML0)    PDF (1990KB)(149)    收藏
为评估即用型沙门氏菌质控样品在基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术鉴定含乳特殊医学用途配方食品中沙门氏菌中的应用价值,通过验证即用型沙门氏菌质控样品的均匀性、稳定性,对-20 ℃贮藏0、14、28 d沙门氏菌质控样品进行质谱鉴定,最后用VITEK全自动微生物分析系统进行生化鉴定。结果表明:即用型沙门氏菌质控样品稳定性良好、均匀性符合要求,所得质谱图相近,VITEK生化鉴定结果为沙门氏菌;即用型沙门氏菌质控菌株可以作为含乳特殊医学用途配方食品中沙门氏菌检测质控样品使用。
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4. 酸奶中乳酸杆菌分离鉴定及其与女性生殖道感染有关的生理生化特性研究
王江; 李晶; 律娜; 朱宝利; 张瑞芬
乳业科学与技术    2012, 35 (5): 12-14.   DOI: 10.15922/j.cnki.jdst.2012.05.004
摘要103)   HTML0)    PDF (1789KB)(101)    收藏
对国内外市售酸奶中添加的乳酸杆菌益生菌进行分离鉴定,对其产H2O2量及与宫颈癌HeLa细胞黏附能力进行分析,并初步判定酸奶中的乳酸杆菌是否对女性生殖道健康具有潜在的保健作用.实验共分离鉴定出10株乳酸杆菌,其中,嗜酸性乳杆菌5株、干酪乳杆菌1株、瑞士乳杆菌1株、鼠李糖乳杆菌1株、植物乳杆菌1株和德式乳杆菌1株.只有瑞士乳杆菌产H2O2量较高且与HeLa细胞的黏附作用较强,其余乳酸杆菌产H2O2的能力偏低.大部分国内外市售酸奶产品中添加的益生菌不具备抑制女性生殖道感染有关的生理生化特性,只有瑞士乳杆菌可能对女性生殖系统的健康具有保护作用.
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